Tirtsepatiidi lisandid

Tirtsepatiid lisandid|Tilpeptiidi lisandite kontroll|Lisandite kohandatud sünteesi ja struktuuri kinnitus|Teadus{0}}Peptiid

Tirtsepatiid lisandite kontroll - GLP-1/GIP dual-sihtravimikvaliteedi uuringutele, ravimite üldisele aruandlusele.Science-Peptiid pakub kohandatud sünteesi tilpeptiidiga seotud lisanditest, sealhulgas deletsioonipeptiididest, oksüdeerunud struktuurilistest lisanditest, rasvhapete koorimise andmetest jne. Toetame teie puhastamise kinnitustooteid, dimeeride abil. spektroskoopia uuring struktuuri kinnitusandmetega. Tere tulemast meiega ühendust võtma.

Tirzepatiid (Tirzepatiid) on GLP-1/GIP topeltagonist, mille Eli Lilly välja mõtles ja see on need kaks aastat olnud täies hoos. Sellel on hea suhkrut alandava ja tugevalt kaalu langetava toimega toime ning seda nimetatakse "kaalu langetamise imeravimi" täiendatud versiooniks. Kodumaised peptiidsete geneeriliste ravimite tootjad, paljud jõllitavad seda – kes saab pärast patendi kehtivusaja lõppu esmalt läbi uuringute kvaliteedi, kellel on võimalus haarata esimene geneeriline ravim.

 

Tilpeptiidi kvaliteeti pole aga nii lihtne uurida. See on keerulisem kui simetikoon, sisaldades 39 aminohapet, rasvhappe kõrvalahelat (eikosaanidiohape) ja linkerit. Sünteesiprotsessi käigus ilmneda võivad lisandid on palju suuremad kui tavalistel peptiididel. Puuduvad peptiidid, oksüdatiivsed lisandid, rasvhappeid eraldavad tooted, dimeerid, linker{4}}seotud lisandid peavad olema kontrolli all ja kõik peavad olema selged.

 

Meil on kogunenud palju kogemusi komplekssete peptiidlisandite sünteesil. Oleme spetsialiseerunud tilpeptiidi uurimisele ja teame, millised on raskused selle lisandite profiilis ja millised on olulised kontrollielemendid. Saame kohandada erinevate tilpeptiidi lisandite kontrollide sünteesi vastavalt teie vajadustele koos struktuuri kinnitusandmetega ja aidata teil meetodi kehtestada, nii et teile esitamisel lisatasu väljastatakse vähem.

Tilpeptiidi molekulaarstruktuur määrab, et selle lisandite profiil on palju keerulisem kui üldistel peptiididel. Lisandite uuringuid tehes keskendume peamiselt järgmistele kategooriatele:

Peptiid puudub
39 aminohapet, millest üks jääb sünteesiprotsessis puudu, on lisand. Puuduvate peptiidide retentsiooniajad HPLC-s olid laialt jaotunud, puuduvate peptiidide erineva polaarsusega erinevates positsioonides. Mõned puuduvad N-otsas, mõned keskel ja mõned rasvhapete kinnituskoha lähedal. Oleme saanud kliendilt tellimuse 15 erinevas asendis puuduva peptiidi jaoks, et lokaliseerida kõik võimalikud puuduvad lisandid nende protsessis.

Oksüdeerivad lisandid
Met tilpeptiidi järjestuses on vastuvõtlik oksüdeerumisele sulfoksiidiks ja seejärel sulfooniks. Oksüdeerunud lisandid ilmnevad sageli stabiilsusuuringutes ja kasvavad teatud aja möödudes. Oleme teinud võrdluse, kiirendatud tingimustes kuu aega võib oksüdatsioonipiik kasvada üle 0,3% ilma kontrollita.

Rasvhappeid eraldavad tooted
See on tilpeptiidile ainulaadne lisand. Selle rasvhapete kõrvalahel (eikosanediohape) on seotud lüsiiniga linkeri kaudu ja see modifikatsioon võib sünteesi või ladustamise ajal osaliselt eralduda, mille tulemusena rasvhape{1}}eemaldab lisandeid. Veelgi probleemsem on see, et eraldumine võib toimuda erinevates kohtades - rasvhappe ja linkeri vahel või linkeri ja peptiidi - vahel, mille tulemuseks on erinevad lisandid. Oleme oma klientide jaoks sünteesinud mitmeid rasvhapetega{6}}seotud lisandeid, alates täielikust eemaldamisest kuni väikese osani.

Dimeerid/polümeerid
Kaks või enam tilpeptiidi molekuli koonduvad kokku, moodustades dimeeri või kõrgema. Dimeeri molekulmass on kaks korda suurem kui põhipiik ja sageli on see HPLC põhjal lai piik, mistõttu tuleb see enne kontrollina kasutamist spetsiaalselt eraldada ja puhastada. Oleme dimeerid ette valmistanud ja üle 95% puhtuse saavutamiseks kulus mitu puhastusringi.

Linker{0}}seotud lisandid
Tilpeptiidi rasvhapete modifikatsioonis kasutatakse linkerit (nt -Glu, PEG jne) ja see linker ise võib sünteesi ajal tekitada kõrvalreaktsioone, tekitades puuduvate või mittetäielike linkeritega lisandeid. Seda tüüpi lisandit tavalistes peptiidides ei leidu, kuid see on ainulaadne tilpeptiidile, mida tuleb spetsiaalselt uurida.

Deamiiditud lisandid
Asparagiin (Asn) ja glutamiin (Gln) desamideeruvad kergesti happelistes või kuumutamistingimustes, mille tulemuseks on isomeerid. Tilpeptiidi järjestuses on mitu Asn-i ja Gln-i ning deamidatsiooni lisand ilmneb sageli sunnitud lagunemise testis, seega tuleb lisandi asukoha määramiseks kasutada kontrollprodukti.

Diastereoisomeerid
Pika ahela sünteesi käigus võivad üksikud aminohapped läbida ratsemiseerumise, mille tulemuseks on diastereoisomeerid. Seda tüüpi lisandite sisaldus ei ole tavaliselt kõrge, kuid eksperdid küsivad seda deklareerimisel ja kinnituseks on parem võtta kontrolltoode.

Paljusid neist lisanditest ei saa osta ja need tuleb kohandada sünteesida. Oleme teinud palju projekte tilpeptiidi lisandite kohandamiseks, hõlmates kõiki ülaltoodud kategooriaid.

Peptiidiseeria kustutamine
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, MS ja NMR kinnitusega. Oleme sünteesinud peptiidide komplekti 5 aminohappe kaugusel N--otsast C--otsani.

Oksüdeerivad lisandid
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% ja saame esitada LC-MS spektri, et kinnitada oksüdatsiooniastet. Sulfoksiid ja sulfoon eraldatakse HPLC abil ja me saame teha mõlemat.

Rasvhappeid eraldavad tooted
See on üks kõige raskemini kasutatavaid lisandeid tilpeptiidis. Rasvhappeahel võib olla täielikult või osaliselt välja lülitatud (nt puuduvad viimased süsinikud). Saame sünteesida mitmeid variante ahela erinevate positsioonide jaoks. Ühes kõige keerulisemas projektis, mida oleme teinud, palus klient meil sünteesida rasvhapete ahelast puuduva 8 süsinikuaatomiga lisandi ja meil kulus kaks kuud, et see õigeks saada.

Dimer
Ristsidumise või mitte-kovalentse interaktsiooni teel moodustunud dimeere saab valmistada erinevate meetoditega ning eraldada ja puhastada, et tagada kõrge puhtusaste. Dimeeride puhastamine on vaevarikas, kuid meil on kogemusi, kuidas monomeere eraldada.

Linker{0}}seotud lisandid
Linker (-Glu, PEG jne) võib puududa või olla mittetäielik, mille tulemuseks on rida seotud lisandeid. Saame sünteesida erinevaid variante puuduvate linkeritega, lühendatud linkeritega või sobimatute linkeritega ning aidata teil selliste lisandite spektreid üles ehitada.

Deamiiditud lisandid
Järjestuses olevate Asn- ja Gln-saitide jaoks saame valmistada deamideeritud lisandite kontrolle sundlagundamise või sihitud sünteesi abil. Molekulmassi erinevus pärast deamiidimist on vaid 1, mida ei ole MS abil lihtne eristada, seetõttu kasutame kinnitamiseks tavaliselt NMR-i või spetsiaalseid kromatograafilisi tingimusi.

Muud kohandatud lisandid
Kui leiate oma uurimistöös uue tundmatu lisandi, saame aidata teil struktuuri analüüsida ja sünteesida. Saatke meile proovid, me teeme LC-MS analüüsi, tuletame struktuuri, seejärel teeme suundsünteesi ning võrdleme kokkuleppe kinnitamiseks retentsiooniaega ja massispektrit. Oleme seda protsessi korduvalt teinud ja õnnestumisprotsent on üsna kõrge.

Analüütiliste meetodite arendamine ja valideerimine
HPLC või LC-MS meetodi seadistamisel on lokaliseerimiseks, eraldumise määramiseks, lineaarse vahemiku kontrollimiseks ja taastumiseks vajalik lisandite kontroll. Ilma kontrollita on meetodi valideerimisel tükk puudu. Paljud kliendid paluvad meil meetodi seadistamiseks esmalt teha mõned olulised lisandid ja seejärel ülejäänud aeglaselt täita.

Heterogeenne massispektromeetria
Geneerilise ravimi deklareerimisel on vajalik protsessi lisandite ja lagunemissaaduste põhjalik kvalitatiivne ja kvantitatiivne analüüs. Iga lisandi asukoht, sisu ja struktuur tuleb kinnitada kontrolltootega. Oleme näinud, et deklaratsioon saadeti täitmiseks, üheksal korral kümnest on selle tüki lisandid ei saanud aru.

Stabiilsusuuringud
Pikaajaliste stabiilsus- ja kiirendatud katsete puhul on vaja kindlaks teha, millised lagunemissaadused on domineerivad ja milline on sisu trend. Lisandite kontrolli abil saame täpselt kvantifitseerida ja jälgida. Klient uuris tilpeptiidi valmistamise stabiilsust ja avastas, et lagunemispiik kasvas kiirendatud tingimustes väga kiiresti, nii et analüüsisime ja sünteesisime seda struktuuri kinnitamiseks MS-i poolt ning seejärel tundis klient sellest teatamisest kergendust.

Partii vabastamise testimine
Pärast turustamist tuleb iga API või koostise partii kõnealuse aine suhtes testida. Lisandite kontrollid on eraldumise testimise olulised vahendid.

Teave geneeriliste ravimite deklaratsioonide kohta
Lisandite uuringud on esitamise teabe põhiosa. Täielike lisandiprofiilide ja kontrolliandmete esitamine vähendab oluliselt ülevaatuse riski.

Juhtum 1: ravimiettevõte, tilpeptiidi geneeriliste ravimite programm
Nad töötavad välja tilpeptiidi üldist versiooni ja vajavad meetodi valideerimiseks täielikku lisandite kontrolli komplekti. Kohandasime nende jaoks 12 lisandit: 5 puuduvat peptiidi, 2 oksüdeerunud lisandit, 1 dimeer, 2 rasvhappeid eraldavat toodet ja 2 linker{7}}seotud lisandit. Igaühe neist on puhtus üle 95% ja nendega on kaasas MS ja NMR andmed. Projekti juht ütles: "Tilpeptiidi lisandeid on kaks korda rohkem kui teistes peptiidides, kuid saate neid kõiki valmistada ja andmed on täielikud, mis säästab meid palju tööd." Hiljem viidi nende meetodi valideerimine edukalt lõpule ja nüüd valmistuvad nad deklaratsiooniks.

Juhtum 2: CRO-ettevõte, lisandiprofiilide koostamine
Nad viisid läbi kvaliteetse uurimisprojekti tilpeptiidi kohta, mis nõudis protsessi lisandite põhjalikku analüüsi. Nad saatsid meile toorpeptiidi proovid ja me teostasime LC-MS analüüsi, tuletasime välja mitmete tundmatute lisandite võimalikud struktuurid, seejärel sünteesisime need sihipäraselt ning võrdlesid retentsiooniaegu ja massispektreid ning kinnitasid nelja uut lisandit - kaks neist olid linker-seotud ja kaks neist olid rasvhapete lisamise variandid. Klient kasutas neid andmeid lisandite profiilide täpsustamiseks ja läbis edukalt kliendi nõusoleku.

Juhtum 3: Stabiilsusuuringud, biotehnoloogiaettevõte
Nad uurisid tilpeptiidi koostise stabiilsust ja leidsid, et lagunemissaaduse kogus suurenes kiirendatud tingimustes kiiresti, kuid nad ei teadnud, mis see on. Analüüsisime proovi LC-MS-ga ja eeldasime, et tegemist on deamiidimislisandiga teatud Asn-i kohas, ning seejärel sünteesisime selle sihipäraselt ja kinnitasime seda võrdlusega. Nad koostasid selle kontrolli abil analüüsi ja jälgisid täpselt lagunemissaaduse suundumust. Hiljem aruannet esitades rõhutasid eksperdid seda osa andmetest ning kindlate andmete tõttu hüvitist ei väljastatud.

Tilpeptiid on populaarne toode, kuid lisandite uurimine on delikaatne töö, eriti rasvhapete koorimistooted ja linker{0}}seotud lisandid, millega paljud tootjad hakkama ei saa. Kui teete kvaliteetset uurimistööd või tilpeptiidi üldist väljatöötamist ja vajate lisandite kontrolli, võtke meiega julgelt ühendust. Oleme teinud palju tööd, teame, millised on raskused, ja teame, kuidas sellest välja tulla.